熒光顯微鏡是以紫外線(xiàn)為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀(guān)察物體的形狀及其所在位置。 熒光顯微鏡用于研究細胞內物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線(xiàn)照射后可發(fā)熒光;
另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線(xiàn)照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
那么熒光顯微鏡在制作標本時(shí)有哪些要求呢?下面一起來(lái)了解一下吧。
1、載玻片
載玻片厚度應在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片， 一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
2、蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強激發(fā)光 ，也可用于涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長(cháng)的光起到不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順利通過(guò)，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標本。
3、標本
組織切片或其他標本不能太厚，若太厚激發(fā)光大部分消耗在標本下部，而物鏡直接觀(guān)察到的上部不充分激發(fā)。另外，細胞重疊或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。
4、封裱劑
封裱劑常用甘油，必須無(wú)自發(fā)熒光，無(wú)色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時(shí)較亮，不易很快褪去 。
5、鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀(guān)察標本時(shí)，必須使用鏡油，最好使用特制的無(wú)熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對圖像質(zhì)量略有影響。
